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技術(shù)文章

ELISA實驗中加樣可能碰到的問題及解決方法

閱讀：2308發(fā)布時間：2018-8-14

    在ELISA實驗中一般有3次加樣步驟，即加標本，加酶結(jié)合物，加底物。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上強烈振蕩。在加樣的過程中會碰到什么問題呢？讓我們一起看一下實驗過程中加樣可能碰到的問題：

1、過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)；

2、手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間；

3、加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。.血清或血漿標本分離不好即進行加樣。

相應解決辦法：

1、標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。

2、加樣后及時放入孵箱。

3、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

4、如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

5、標本較多時，請分批操作。

    


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