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技術(shù)文章

滴加抗體注意事項

閱讀:404發(fā)布時間:2015-9-21

在做實驗之前必須確定確定試劑盒樣本是否收集完成,樣本收集量以及保存情況,樣本是否出現(xiàn)溶血情況,準(zhǔn)備實驗前是否做好序號標(biāo)記情況。因為每次實驗前應(yīng)列出詳細(xì)實驗計劃,其中包括實驗?zāi)康摹M用方法、所用一抗和二抗的種類和效價、預(yù)實施的操作流程方案以及預(yù)期實驗結(jié)果等。實驗分組編號用玻璃筆標(biāo)記在玻片上,對每一抗體均應(yīng)配以陽性和陰性對照。以下關(guān)于滴加抗體操作注意事項作出詳細(xì)講解。

      切片在血清封閉后,傾去多余血清,便可滴加*抗體。滴加前取出玻片,用吸水紙拭去組織周圍的液體,組織與細(xì)胞表面的液體要用濾紙條輕輕吸掉,但注意勿使 組織干燥,盡快滴加抗體工作液1(50ul)于組織表面。由于切片周圍無液體,滴加的抗體成為一個液滴,這樣既可節(jié)省抗體,又可增加抗原與抗體結(jié)合的 機會。如果玻片上是培養(yǎng)細(xì)胞,應(yīng)在鏡下選擇一個理想的區(qū)域用免疫組織化學(xué)油筆在此區(qū)域外圍畫一圓圈,再滴加抗體,爾后應(yīng)輕輕搖動切片數(shù)秒,以促進抗體與組 織待測抗原的結(jié)合,避免假陰性小區(qū)的出現(xiàn)。這一操作過程雖然簡單,卻十分重要。加抗體時切忌加樣器或吸頭碰到組織或細(xì)胞,以免造成破損。


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