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技術文章

ELISA試劑盒操作步驟

閱讀:312發(fā)布時間:2017-6-5

ELISA試劑盒的步驟:
1.在使用之前要將試劑充分的混合均勻,但是要注意在搖晃的時候不要產(chǎn)生過多的泡沫,從而造成有太多的空氣進入試劑中,產(chǎn)生測試誤差。
2.根據(jù)要檢測樣品的數(shù)量來確定的板條數(shù)。每個比對的樣品和空白孔是做復孔,而樣品的數(shù)量就可以自己視情況而定,不過能用復孔的還是用復孔。將標本液體1:1稀釋后倒入50微升的反應孔中。
3.在反應孔中在加入50微升的待測樣品,然后馬上加入50微升的*標記抗體,蓋上模板,輕輕搖晃使其混合均勻后,在37攝氏度的恒溫下等待1小時。
4.將孔內(nèi)液體甩去,加滿洗滌液,震蕩約30秒后,在甩去洗滌的液體,用紙將水吸干。這樣子重復三次。再在沒空加入80微升的親和鏈酶素-HRP,同上混合均勻后,在37攝氏度的恒溫環(huán)境下等待半小時。
5.同步驟四的洗滌方法。洗滌干凈后,在沒空中加入底物A,B各50微升,小心混合均勻,避免光照在37攝氏度下等待10分鐘。
6.取出酶標板,迅速加入終止液50微升,測定結果。在450納米的波長處檢測各個孔的OD值。


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