斜面培養(yǎng)基相對(duì)和并列的概念是：平面培養(yǎng)基、高層培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基倒在培養(yǎng)皿內(nèi)，凝固成平面的稱為平板培養(yǎng)基，用于菌種分離及研究菌類的某些特性；分裝在試管內(nèi)，直立凝固而制成的稱為高層培養(yǎng)基，這樣接入菌種后雖然發(fā)育的面小了一點(diǎn)，但培養(yǎng)基的厚度增大，營(yíng)養(yǎng)豐富，時(shí)間長(zhǎng)些也不容易干燥、開(kāi)裂，常用于保存菌種。
1、配制溶液
向容器內(nèi)加入所需水量的一部分，按照培養(yǎng)基的配方，稱取各種原料，依次加入使其溶解，zui后補(bǔ)足所需水分。對(duì)蛋白胨、肉膏等物質(zhì)，需加熱溶解，加熱過(guò)程所蒸發(fā)的水分，應(yīng)在全部原料溶解后加水補(bǔ)足。
配制固體培養(yǎng)基時(shí)，先將上述已配好的液體培養(yǎng)基煮沸，再將稱好的瓊脂加入，繼續(xù)加熱至*融化。并不斷攪拌，以免瓊脂糊底燒焦。
2、調(diào)節(jié)pH值
用pH試紙（或pH電位計(jì)、氫離子濃度比色計(jì)）測(cè)試培養(yǎng)基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH進(jìn)行調(diào)節(jié)，直到調(diào)節(jié)到配方要求的pH值為止。
3、過(guò)濾
用濾紙、紗布或棉花趁熱將已配好的培養(yǎng)基過(guò)濾。用紗布過(guò)濾時(shí)，折疊成六層，用濾紙過(guò)濾時(shí)，可將濾紙折疊成瓦棱形，鋪在漏斗上過(guò)濾。
4、分裝
已過(guò)濾的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行分裝。如果要制作斜面培養(yǎng)基，須將培養(yǎng)基分裝于試管中。如果要制作平板培養(yǎng)基或液體、半固體培養(yǎng)基，則須將培養(yǎng)基分裝于錐形瓶?jī)?nèi)。
分裝時(shí)，一手捏松彈簧夾，使培養(yǎng)基流出，另一只手握住幾支試管或錐形瓶，依次接取培養(yǎng)基。分裝時(shí)，注意不要使培養(yǎng)基粘附管口或瓶口，以免浸濕棉塞引起雜菌污染。
裝入試管的培養(yǎng)基量，視試管和錐形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培養(yǎng)基時(shí)，每只15×150毫米的試管，約裝3～4毫升（1/4～1/3試管高度），如制作深層培養(yǎng)基，每只20×220毫米的試管約裝12～15毫升。每只錐形瓶裝入的培養(yǎng)基，一般以其容積的一半為宜。
5、加棉塞
分裝完畢后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過(guò)濾空氣，避免污染。棉塞應(yīng)采用普通新鮮、干燥的棉花制作，不要用脫脂棉，以免因脫脂棉吸水使棉塞無(wú)法使用。制作棉塞時(shí)，要根據(jù)棉塞大小將棉花鋪展成適當(dāng)厚度，揪取手掌心大小一塊，鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中，用右手食指插入棉花中部，同時(shí)左手食指與拇指稍稍緊握，就會(huì)形成1個(gè)長(zhǎng)棒形的棉塞。棉塞作成后，應(yīng)迅速塞入管口或瓶口中，棉塞應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙，以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過(guò)緊過(guò)松，塞好后，以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應(yīng)在管內(nèi)或瓶?jī)?nèi)，上端露出少許棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上厚紙用繩捆札，準(zhǔn)備滅菌。
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