人小梁網(wǎng)細(xì)胞
細(xì)胞傳代的一般方法
開始人小梁網(wǎng)細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、*溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%*、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,*溶液0.3m1,7.5%*溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%*溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到*中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。
其它供應(yīng)新產(chǎn)品:
xy-E12367 大鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒
xy-E12368 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒
xy-E12369 大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒
xy-E12370 大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒
xy-E12371 大鼠纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒
xy-E12372 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒
xy-E12373 大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒
xy-E12374 大鼠血小板反應(yīng)蛋白/*敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒
xy-E12375 大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒
xy-E12376 大鼠*(FA)ELISA試劑盒
xy-E12377 大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒
xy-E12378 大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒
xy-E12379 大鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒
xy-E12380 大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒
xy-E12381 大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒
xy-E12382 大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒
xy-E12383 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒
xy-E12384 大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒
xy-E12385 大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒
xy-E12386 大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒
xy-E12387 大鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒