人角膜細(xì)胞
細(xì)胞傳代的一般方法
開始人角膜細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、*溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%*、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,*溶液0.3m1,7.5%*溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%*溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到*中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。
其它供應(yīng)新產(chǎn)品:
y-E12222 大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒
xy-E12223 大鼠L-鼠乳酸脫氫酶(L-LDH) ELISA試劑盒
xy-E12224 大鼠脂酰*合成酶(ACS)ELISA試劑盒
xy-E12225 大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)ELISA試劑盒
xy-E12226 大鼠磷酸化乙酰*羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒
xy-E12227 大鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒
xy-E12228 大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒
xy-E12229 大鼠乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒
xy-E12230 大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒
xy-E12231 大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒
xy-E12232 大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒
xy-E12233 大鼠*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒
xy-E12234 大鼠*釋放激素受體抗體(GNRHR-Ab)ELISA試劑盒
xy-E12235 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒
xy-E12236 大鼠主要堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
xy-E12237 大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒
xy-E12238 大鼠鈣調(diào)磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒
xy-E12239 大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒
xy-E12240 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒
xy-E12241 大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒
xy-E12242 大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒