人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞
細(xì)胞傳代的一般方法
開(kāi)始人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、*溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%*、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,*溶液0.3m1,7.5%*溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%*溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到*中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。
其它供應(yīng)新產(chǎn)品:
xy-E11643 人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒
xy-E11644 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒
xy-E11645 人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒
xy-E11646 人踝蛋白(talin)ELISA試劑盒
xy-E11647 人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒
xy-E11648 人β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒
xy-E11649 小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA試劑盒
xy-E11650 小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒
xy-E11651 小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒
xy-E11652 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
xy-E11653 小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒
xy-E11654 小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒
xy-E11655 小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒
xy-E11656 小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒
xy-E11657 小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒
xy-E11658 小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
xy-E11659 小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒
xy-E11660 小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒
xy-E11661 小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒
xy-E11662 小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒
xy-E11663 小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒