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Mv.1.LuNBL-7貂肺上皮細胞

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產(chǎn)品型號

品牌

廠商性質(zhì)代理商

所在地上海市

更新時間:2016-07-15 01:36:01瀏覽次數(shù):578次

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Mv.1.LuNBL-7貂肺上皮細胞上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標準胎牛血清,gibco特優(yōu)級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標記抗體(FITC標記抗體)Mv.1.LuNBL-7貂肺上皮細胞
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調(diào)整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
Trisphenol 2,6-雙[(2-羥基-3,5-二甲基苯基)甲基]-4-甲基* 35924-04-0
Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7-triacetate HydrobroMide 1,4,7-三(叔丁氧碳酰甲基)-1,4,7,10-氮雜環(huán)十四烷 122555-91-3
Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7-triacetate HydrobroMide  149353-23-1
Tri-tert-butylphosphine tetrafluoroborate 四氟硼酸三叔丁基膦 131274-22-1
TRITON X-100, 168 KG (157.7 L)  
TRITON X-100, 2.5L (2.663KG);  
Triton X-100, 25.4 L (27 Kg)  
Trivinylboroxin 2,4,6-三乙烯基環(huán)硼氧烷 92988-08-4
Tropenol hydrochloride 8-甲基-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛-6-烯-3-醇鹽酸鹽 99709-24-7
trypan blue 3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸)四鈉鹽 72-57-1
Trypanothione  96304-42-6
TulathroMycin B 托拉菌素 B 280755-12-6
TulathroMycin A 托拉菌素 A 217500-96-4
Tungsten broMide (WBr5) 溴化鎢 13470-11-6
Tween 60 吐溫 60 9005-67-8
Tylosin tartrate 酒石酸泰洛星 1405-54-5
TyraMine Base 4-羥基* 51-67-2
TYROTHRICIN 短桿菌素 1404-88-2
ubiquinol  56275-39-9
UBIQUINOL 水溶型* 992-78-9
Udenafil 3-(6,7-二氫-1-甲基-7-氧代-3-丙基-1H-吡唑并[4,3-D]嘧啶-5-基)-N-[2-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙基]-4-丙氧基苯磺酰胺 268203-93-6
tridecyl phosphate 二氫磷酸十三烷基酯 5116-94-9
TIANEPTINE 噻奈普汀 66981-73-5
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜細胞瘤

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NCI-H446 H446小細胞肺癌細胞

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QGY-7701肝癌細胞

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