小鼠胰島素（INS）ELISA試劑盒基因工程試劑對免疫測定技術(shù)發(fā)展的影響
     免疫測定技術(shù)的基礎在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應，所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料，如抗原抗體，酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體，而抗原或抗體的標記物如酶標結(jié)合物則通過各種化學合成方法制備。近年來，隨著分子生物學的發(fā)展，使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑，各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。
小鼠胰島素（INS）ELISA試劑盒HBsAg試劑特點（檢測模式：臨床抗體夾心法）：包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點的鼠復合單位，可測得HBsAg變異樣品，提高檢測的特異性（99.98%）提高檢測的靈敏度，應用Parl Ehrich 學說（PEI）HBsAg標準品，對ad標準品的靈敏度為0.05ng/ml對ay標準品靈敏度為0.025ng/ml方法一　雙抗體夾心法
　　1.　包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
　　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
　　　3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。
　　　4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
　　　5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
　　　6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值： DU145（前列腺癌）  原鈣黏素1（PCDH1） *原Ⅱ（Try-Ⅱ）
Lncap（前列腺癌）  白介素2受體（IL-2R） 腺苷脫氨酶（ADA）
PC-3（前列腺癌）  皮膚T虜獲趨化因子（CTACK/CCL27） 透明質(zhì)酸酶（HAase）
MOLT-4（急性淋巴母白血?。?nbsp; 胸腎表達趨化因子（BRAK/CXCL14） 天*氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）
5637（膀胱癌）  B-淋巴趨化因子1（BLC-1/CXCL13） 酸性磷酸酶（ACP）
Raji（Burkitt's 淋巴瘤）  結(jié)締組織活化肽Ⅲ（CTAPⅢ） 葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶（GPI）
SCaBER（膀胱鱗癌）  巨噬集落刺激因子受體（M-CSFR） 磷酸葡萄糖變位酶（PGM）
NAMALWA（Burkitt's 淋巴瘤）  免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ（FcαRⅠ/CD89） 亮氨酰氨基肽酶（LAP）
T24（膀胱移行癌）  免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ（FcεRⅡ/CD23） 鏈激酶（SK）
HuT78（T淋巴白血?。?nbsp; 免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ（FcγRⅢ/CD16） 核糖核酸酶（RNASE）
SW-13（腎上腺皮質(zhì)腺癌 ）  免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ（FcγRⅡ/CD32） 過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶（LPO）

測試劑盒檢測原理

　　　ELISA檢測試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗體，這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應，只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復合物的孔才會發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應，并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。