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上海哈靈生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： ELISA代測(cè)服務(wù),ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒,ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū),大鼠ELISA試劑盒 |
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哈靈生物提供 Real time PCR 技術(shù)服務(wù)
2013-7-22 閱讀(765)
一、樣品制備方法:
1.懸浮細(xì)胞：
懸浮細(xì)胞培養(yǎng)液倒入離心管中，離心沉積細(xì)胞，棄去上清液。參入1ml PBS懸浮細(xì)胞，轉(zhuǎn)入小離心管中，低速離心沉淀細(xì)胞，棄去PBS，將細(xì)胞沉積（1×107個(gè)細(xì)胞）放入-70℃ 冰箱保管。干冰運(yùn)送。也能夠在細(xì)胞沉積中參加1ml的 Trizol 裂解液重復(fù)吸打幾回，目視可見(jiàn)細(xì)胞層溶解*后，-70℃保管作用更佳。
2.貼壁細(xì)胞：
取大約1×107個(gè)貼壁細(xì)胞，胰酶消化后參入PBS懸浮細(xì)胞，低速離心搜集，棄去液體，參加 1 ml PBS懸浮細(xì)胞，轉(zhuǎn)入1.5ml離心管中，低速離心沉積細(xì)胞，棄去PBS，放入-70℃冰箱保管。干冰運(yùn)送。也能夠在細(xì)胞沉積中參加1ml的 Trizol 裂解液重復(fù)吸打幾回，目視可見(jiàn)細(xì)胞層溶解*后，-70℃保管作用更佳。
3.組織：
收集新鮮組織（注意：生物體逝世后1分鐘內(nèi)取資料并保管好），組織塊以PBS或生理鹽水清潔干凈，切為小塊，放入液氮或-70℃冰箱中保管，干冰運(yùn)送。也可每 50-100 mg 組織加1 ml Trizol溶液勻漿裂解組織樣品。勻漿的裂解液4℃ 短期保管（1個(gè)月）。-20℃或-70℃長(zhǎng)時(shí)間保管。
二、樣品的要求：
1. 盡可能新鮮的樣品。
2. 質(zhì)量大約150毫克的組織樣本。
3. 細(xì)胞數(shù)大于1×107的細(xì)胞樣本
三、注意事項(xiàng)：
1.因RNA比較容易出現(xiàn)降解，建議將標(biāo)本加入Trizol后運(yùn)輸。
2.實(shí)驗(yàn)所需要準(zhǔn)備的取材工具以及組織存放器皿等必須得經(jīng)過(guò)滅菌除酶處理。
3.取材的實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求沒(méi)有RNA酶污染。
4.客戶必須自備引物。也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成。
