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上海哈靈生物科技有限公司
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組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書
2015-5-28 閱讀(733)
提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 36KB |
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資料圖片 | 下載次數(shù) | 128次 | |
資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 733次 |
主要用途
組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)乙酰膽堿酯酶反應(yīng)系統(tǒng)中釋放出巰基膽堿,使用Ellman試劑后,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物,出現(xiàn)吸光峰值的變化,即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)胞裂解樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動(dòng)物、人體等)乙酰膽堿酯酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
乙酰膽堿酯酶(Acetylcholinesterase;AchE;EC3.1.1.7),又稱為紅細(xì)胞膽堿酯酶(RBC cholinesterase),廣泛存在于真核生物,包括某些植物,尤其在腦組織、神經(jīng)肌肉連接處(neuromuscular junction)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的膽堿能突觸(cholinergic synapses)和紅細(xì)胞膜上高度表達(dá),催化主要的神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的水解反應(yīng),產(chǎn)生乙酸和膽堿,終止突觸傳導(dǎo)。其功能在于調(diào)節(jié)乙酰膽堿作用。神經(jīng)毒氣,例如有機(jī)磷shalin(Sarin),抑制乙酰膽堿酯酶活性,導(dǎo)致神經(jīng)肌肉癱瘓,zui終發(fā)生窒息(asphyxiation)。血清乙酰膽堿酯酶濃度顯著降低與有機(jī)磷殺蟲劑中毒有關(guān),因此血液檢測(cè)是環(huán)境污染的重要指標(biāo)。基于人工合成底物碘化硫代乙酰膽堿(acetylthiocholine iodide)在乙酰膽堿酯酶的作用下,水解產(chǎn)生乙酸和硫代膽堿(thiocholine),與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通過(guò)其吸收峰值的變化(412nm波長(zhǎng)),來(lái)定量分析乙酰膽堿酯酶的活性。乙酰膽堿酯酶反應(yīng)系統(tǒng)為: