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上海哈靈生物科技有限公司
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冰凍切片組織線粒體膜通道孔（MPTP）熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
2019-5-20 閱讀(579)
主要用途
冰凍切片組織線粒體膜通道孔（MPTP）熒光檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)鈣黃綠素-鈷技術(shù)，選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色，而存在于或由線粒體釋放到細(xì)胞漿的熒光染料，即刻發(fā)生熒光淬滅，來(lái)分析和觀察線粒體膜通道孔活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種冰凍組織線粒體（動(dòng)物、人體、昆蟲(chóng)等）膜通道孔活性的檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，分辨率高，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
線粒體膜通道孔（mitochondrial permeability transition pore；MPTP）是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴(lài)性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時(shí)，線粒體內(nèi)容物通過(guò)膜通道孔釋放到胞漿中。膜通道孔的開(kāi)放，顯著改變線粒體的通透性。鈣離子過(guò)度進(jìn)入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開(kāi)放，而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。鈣黃綠素-AM，又稱(chēng)雙甲亞胺二乙酸鈉熒光素-乙酰氧基甲基酯【bis（bis-carboxymethyl amino methyl fluorescein）-acetoxymethyl ester】，作為熒光探針：，適宜的分子量622d，小于1.5kd；第二，幾乎不具有膜結(jié)合性；第三，不是線粒體酶的底物；第四，容易進(jìn)入細(xì)胞及其線粒體。鈣黃綠素-AM進(jìn)入細(xì)胞后，被細(xì)胞內(nèi)酯酶切離，產(chǎn)生具有極性的熒光性強(qiáng)的鈣黃綠素。鈣黃綠素進(jìn)入線粒體后，被線粒體俘獲。同時(shí)胞漿內(nèi)的鈣黃綠素受到其淬滅劑鈷離子的淬滅。一旦線粒體膜通道孔瞬時(shí)開(kāi)放，鈣黃綠素釋放出來(lái)，被鈷離子淬滅。線粒體內(nèi)鈣黃綠素?zé)晒獾淖兓?，表明膜通道孔的開(kāi)放狀態(tài)。
