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上海哈靈生物科技有限公司
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結(jié)晶紫細(xì)胞群落染色試劑盒產(chǎn)品說明書
2017-4-5 閱讀(845)
主要用途
結(jié)晶紫細(xì)胞染色試劑是一種旨在使粘附生長的單細(xì)胞層細(xì)胞（群落）攝取結(jié)晶紫染料而獲得細(xì)胞繁殖密度定量信息的廣譜染色材料和而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明、*雜志推薦的。其適用的細(xì)胞是呈單細(xì)胞層（Monolayer）生長的人體和動物細(xì)胞。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，性能穩(wěn)定，細(xì)胞著色率100％。
技術(shù)背景
結(jié)晶紫也可稱之為龍膽紫。當(dāng)它溶解后，可以被活細(xì)胞攝入。同時可以使DNA、蛋白質(zhì)、脂肪著色。染色顯示細(xì)胞核呈藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)呈粉紅色。肉眼顯示整個細(xì)胞呈深藍(lán)色。在分光光度計或酶標(biāo)儀上可以進行定量分析以評價細(xì)胞生長繁殖情況。
產(chǎn)品內(nèi)容
清理液（Reagent A） 毫升
染色液（Reagent B） 毫升
溶解液（Reagent C） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
清理液（Reagent A）保存在4℃冰箱里，其余的保存在室溫下；染色液（Reagent B），避免光照，有效保證1年
用戶自備
封口膜：用于密封培養(yǎng)板后保存
顯微鏡：用于觀察細(xì)胞染色
分光光度計：用于定量檢測細(xì)胞生長繁殖情況
實驗步驟
1． 小心抽掉多孔細(xì)胞培養(yǎng)板里的培養(yǎng)液
2． 輕輕加入適量的清理液（Reagent A）到每個培養(yǎng)孔里（見下表）
3． 小心抽去清理液
4． 加入適量的染色液（Reagent B）到每個培養(yǎng)孔里（見下表）
多孔培養(yǎng)板
容量
96
微升
48
微升
24
微升
12
毫升
6
毫升
5． 在室溫下靜置20分鐘
6． 抽去染色液（Reagent B）
7． 重復(fù)實驗步驟2和3三次，培養(yǎng)孔顯示粉紅色
8． 抽去所有液體，倒置培養(yǎng)板在紙巾上，使其吸干培養(yǎng)孔里的殘存液體
9． 肉眼或顯微鏡觀察：細(xì)胞核呈藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)呈粉紅色。整個細(xì)胞呈深藍(lán)色
10．用封口膜密封培養(yǎng)板，在室溫下長時間保存
11．如果重新啟封觀察，發(fā)現(xiàn)樣本干枯或收縮，只需加上適量的清理液（Reagent A）則可
12．如果需要定量測試，加上適量的溶解液（Reagent C）（見下表）
多孔培養(yǎng)板
容量
96
微升
48
微升
24
微升
12
毫升
6
毫升
13．輕輕搖動培養(yǎng)板，直到溶解液（Reagent C）均勻分布
14．在室溫下，孵育5分鐘
15．即刻放進分光光度計測讀，波長為570 nm
2
注意事項
1． 本產(chǎn)品為250次（24孔板）、500次（48孔板）、1000次（96孔板）操作
2． 細(xì)胞染色前后的清洗過程中，小心操作，以免將細(xì)胞沖洗掉，而影響定量分析
3． 在細(xì)胞清洗過程中，可以將培養(yǎng)板整個翻轉(zhuǎn)，一次性傾倒其染色液和清洗液
4． 本公司提供系列細(xì)胞繁殖檢測試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定細(xì)胞固著力強，著色率100％
