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胎牛血清,小牛血清,新生牛血清之間的區(qū)別,保存及用法
2017-2-6 閱讀(21575)
胎牛血清(無菌采制),小牛血清,新生牛血清之間的區(qū)別,保存及用法
胎牛血清(無菌采制)
制作工藝:
系采用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料,經(jīng)無菌采集、批量混合、分裝而成
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):
內(nèi)毒素含量低于5EU/ml,克隆形成率≥90%。
適用范圍:
用于細(xì)胞株的保藏及嬌貴細(xì)胞株培養(yǎng)。
胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)分,經(jīng)過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,重生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出世10至14 天的小牛。組份與比例不一樣:兩者所含的促細(xì)胞成長(zhǎng)細(xì)胞成長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不一樣,用途與用法不一樣:某些細(xì)胞必需胎牛血清才干成長(zhǎng),而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,運(yùn)用濃度不一樣,通常在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。 血清保留和運(yùn)用須留意:血清應(yīng)保留在-5℃至-20℃,若存放在4℃不行超越一個(gè)月。凍結(jié)血清時(shí) ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,不行將冷凍的血清直接放入37℃水浴或許溫箱中,如放在37℃凍結(jié),色彩加深,粘稠度也會(huì)增加,血清在凍結(jié)和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保留,防止重復(fù)凍融。 2、胎牛血清,小牛血清和重生牛血清三種之間的差異: 這三種血清的成份,整體沒有什么顯著不一樣,只是有一些成分與其生存環(huán)境有關(guān),如上述有人說的抗體很少等。此外,因成長(zhǎng)發(fā)育的需求,有些成分在小牛出世后會(huì)發(fā)作一些改變。不過還沒有搞明白它與其它的血清之間的不一樣。有一點(diǎn)能夠必定,胎牛血清中的有些功用蛋白與小牛血清中的含量有不一樣。 3、zui為重要的一點(diǎn)是: 胎牛自身生活在一個(gè)潔凈環(huán)境傍邊,其血清與外界隔絕,只需生產(chǎn)工藝科學(xué)規(guī)范,其質(zhì)量必定要比后兩者好。 4、根據(jù)牛出世時(shí)間和血清采制別離方法分為: (1)胎牛血清:八月齡胎牛心臟穿刺取血; (2)重生牛血清:出世12-24小時(shí)重生牛靜脈采血;又可細(xì)分為:a.重生牛血清:采血后靜置天然分出的血清;b.標(biāo)準(zhǔn)重生牛血清:c.經(jīng)離心別離的血清;d.一般重生牛血清:融血或微融血的血清; (3)小牛血清:出世三月齡小牛動(dòng)脈采血?jiǎng)e離血清; 血清是血漿去掉纖維蛋白而形成的一種很雜亂的混合物,其構(gòu)成成份雖大有些已知,但還有一有些尚不明白,且血清構(gòu)成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和養(yǎng)分條件不一樣而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、成長(zhǎng)因子、激素、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)推進(jìn)細(xì)胞成長(zhǎng)或抑制成長(zhǎng)活性是到達(dá)生理平衡的。對(duì)血清的成分和效果的研討雖有很大進(jìn)展,但仍存在一些問題。