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上海哈靈生物科技有限公司
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端粒酶活性TRAP 實時定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
2016-7-27 閱讀(515)
主要用途
我公司端粒酶活性TRAP 實時定量檢測試劑是一種旨在運用SYBR 綠色熒光染料作為標(biāo)記信號，結(jié)合端粒重復(fù)序列擴(kuò)增方法（TRAP），既方便、快速地進(jìn)行各種DNA 模板的擴(kuò)增，又實時檢測和定量分析擴(kuò)增產(chǎn)物，即端粒酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。廣泛應(yīng)用于腫 瘤、衰老等研究。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，無核酶污染，操作便捷，敏感，定量準(zhǔn)確，重復(fù)性強(qiáng)，效果滿意，質(zhì)量保證。
注意事項
1. 本產(chǎn)品為20 次PCR 反應(yīng)
2. 操作時，須戴手套
3. 本產(chǎn)品適合各種熒光定量PCR 儀
4. 建議整個操作在4℃下進(jìn)行
5. 必須使用帶濾芯的槍頭
6. 所有器皿、離心管、液體等無RNA 酶污染
7. 使用時，避免污染母液
8. 建議使用裂解液或無離子水作為陰性對照
9. 根據(jù)用戶PCR 儀的性能，決定是否加入封隔液（Reagent E）
10. 配制完成后，即刻進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，以確保反應(yīng)物的活性
11. 試劑避免反復(fù)凍融
12. 通常樣品量范圍為1.6 納克至1 微克；理想范圍為250 納克；如果沒有反應(yīng)，可能樣品中存在PCR 抑制劑，建議調(diào)整樣品量為100 至200 納克
13. PCR 擴(kuò)增反應(yīng)的zui初3 個循環(huán)為定量基線；3 至15 個循環(huán)的熒光信號的10 倍值為熒光閾值；熒光信號達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)為Ct 值（參考圖像如下）：其中6 號為陰性對照
14. Ct 值作為端粒酶活性的計量單位
15. 用戶可以使用293 細(xì)胞（10，100，和1000 細(xì)胞數(shù)）作為陽性對照，以此建立標(biāo)準(zhǔn)曲線：橫座標(biāo)（X軸）為細(xì)胞量對數(shù)，縱座標(biāo)（Y 軸）為Ct 值
16. 如果檢測卵細(xì)胞樣品，建議平均每個卵細(xì)胞使用5 微升裂解液（Reagent A）裂解細(xì)胞，孵育60 分鐘，取1/10 至1/20 的卵細(xì)胞量，進(jìn)行定量擴(kuò)增反應(yīng)
本公司提供系列端粒酶活性檢測試劑產(chǎn)品
如：
端粒酶活性TRAP實時定量檢測試劑盒
