上海泛柯帶您深度觀察細(xì)胞傷口愈合實(shí)驗(yàn)

   上海泛柯實(shí)業(yè)有限公司長期經(jīng)營elisa試劑盒及生物試劑、酶、細(xì)胞等生物化學(xué)試劑。各類產(chǎn)品齊全，價(jià)格實(shí)惠，質(zhì)量有保證，并且可以提供免費(fèi)代測，請您放心選購，咨詢！

  試劑盒性能:

·準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

·靈敏度：zui低檢測濃度小于10 pg/ml。

·特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

·重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

有效期：6個(gè)月

用途：本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究

規(guī)格：48T/96T(可提供免費(fèi)代測服務(wù))

   ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
1. 樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)榀B氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。
2. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 樣本應(yīng)充分離心，不得有溶血及顆粒。
4. 實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
5. 酶標(biāo)包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
6. 建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
7. 牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍，計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
8. 本試劑盒定量范圍為20-640ng/L，超過此范圍，為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得，不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果（20-640ng/L范圍內(nèi)），乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
9. 底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。
10. 為避免交叉污染，標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個(gè)就要更換一次吸頭；酶標(biāo)工作液、*和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復(fù)使用封板膜。
11. 試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用，不同批號(hào)的試劑不得混用。
12. 若顯色過淺，可適當(dāng)延長底物溫育時(shí)間。
  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
  1. 細(xì)胞在含有10%FBS的DMEM培養(yǎng)基中生長。
  2. 細(xì)胞以一定密度接種到24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，生長24小時(shí)后，單層細(xì)胞融合度應(yīng)達(dá)到70-80%。
  3. 不要更換培養(yǎng)基。用新的1ml槍頭輕輕的在單層培養(yǎng)細(xì)胞間劃痕，劃痕橫穿過孔，槍頭盡量與板孔的底部垂直，不要傾斜。這樣產(chǎn)生的gap的距離才與槍頭末端的外直徑相等。Gap的距離可以選用不同型號(hào)的槍頭調(diào)節(jié)。劃痕在同一方向成一條直線。
  4. 在垂直與*條劃痕的方向制作另一條劃痕，每孔劃痕成十字交叉型。
  5. 計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計(jì)算出對應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
  6. 每孔添加新鮮培養(yǎng)基。
  7. （培養(yǎng)基中含有某些成分，如抑制/促進(jìn)細(xì)胞遷移和/或增殖的化學(xué)物質(zhì)）。
  8. 細(xì)胞生長48小時(shí)（或根據(jù)時(shí)間需要）。
  9. 1xPBS清洗細(xì)胞兩次，然后使用3.7%多聚甲醛固定30分鐘。
  10. 0.1%的結(jié)晶紫（2%乙醇溶解）染色30分鐘。
  11. 染色的單層細(xì)胞選取不同的視野，顯微鏡拍照。gap的距離可通過Photoshop或ImagJ軟件測量.為了降低實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可變性，建議每孔選擇多個(gè)視野觀察，每組做多個(gè)重復(fù)。
  12. 劃痕后，用培養(yǎng)基輕輕的清洗板孔2次，以去除脫落細(xì)胞。

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產(chǎn)品訂購說明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。

2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。

3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日價(jià)格為準(zhǔn)。

4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。

5、請辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。