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上海泛柯實(shí)業(yè)有限公司

在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備步驟

時(shí)間:2014-1-20閱讀:434
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            在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備步驟

上海泛柯實(shí)業(yè)有限公司是中國(guó)的科研實(shí)驗(yàn)生物試劑商。產(chǎn)品貨期快、質(zhì)量品牌保障,歡迎各位新老客戶惠顧!ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。

實(shí)驗(yàn)前期的準(zhǔn)備步驟

 1仔細(xì)閱讀說(shuō)明書
  2確定試劑盒在有效期內(nèi)
  3按說(shuō)明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
  4標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存
  5準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等
  6根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
  7按說(shuō)明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑
  DIY夾心法ELISA常見(jiàn)技術(shù)指南
  8選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì);若選擇兩個(gè)單抗,必須識(shí)別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對(duì)。
  9ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí),應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說(shuō)明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
  10標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,瞬時(shí)離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說(shuō)明書中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
  11一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做82倍系列稀釋從2000pg/ml15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
  12為了優(yōu)化靈敏度,建議過(guò)夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
  13若使用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物酶的活性。
  14當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí),如血清,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.

上海泛柯實(shí)業(yè)有限公司是國(guó)內(nèi)的生物試劑供應(yīng)商,我公司現(xiàn)貨供應(yīng),如有需要請(qǐng)與我司工作人員。上海泛柯2014年將繼續(xù)為大家供應(yīng)zui的產(chǎn)品!

 

 

 

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