低生長(zhǎng)因子無(wú)酚紅無(wú)抗生素基質(zhì)膠篩選自從富含胞外基質(zhì)蛋白的小鼠瘤中提取出的天然基底膜基質(zhì)。主要依次為層粘連蛋白（Laminin）、IV型膠原蛋白（Col-IV）、巢蛋白（Entactin）、硫酸乙酰肝素蛋白多糖（Heparan sulphate proteoglycans）及多種細(xì)胞因子，但這些生長(zhǎng)因子的占比均低于標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠，如類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子（IGF-1）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（TGF-β）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）等。產(chǎn)品溶解于高糖DMEM中，且非定制產(chǎn)品均添加了50μg/mLqingdameisu
推薦應(yīng)用
模基生物低生長(zhǎng)因子無(wú)酚紅無(wú)抗生素基質(zhì)膠推薦用于類(lèi)器官研究，如腸、腦、肝等器官的類(lèi)器官培養(yǎng)。
產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存/運(yùn)輸條件 |
082733 | 低生長(zhǎng)因子無(wú)酚紅無(wú)抗生素基質(zhì)膠 | 10mL | ≤-20°C |
0827335 | 低生長(zhǎng)因子無(wú)酚紅無(wú)抗生素基質(zhì)膠 | 5mL | ≤-20°C |
082733T | 低生長(zhǎng)因子無(wú)酚紅無(wú)抗生素基質(zhì)膠 | 1mL | ≤-20°C |
產(chǎn)品參數(shù)
來(lái)源：小鼠瘤
外觀：①顏色：產(chǎn)品表現(xiàn)為半透明淡黃色； ②形態(tài)：4℃融解后，呈液態(tài)
濃度：蛋白濃度范圍在8~13mg/mL之間
內(nèi)毒素：≤ 4.5EU/ mL
凝膠時(shí)間：室溫條件下5-30min凝膠，37°C時(shí)成膠速度加快
產(chǎn)品質(zhì)量控制規(guī)范
根據(jù)GB 14922.2-2011檢測(cè)小鼠種群中的病毒、病原菌寄生蟲(chóng)及細(xì)菌結(jié)果為陰性。
直接接種法檢測(cè)產(chǎn)品中是否含真菌、細(xì)菌，結(jié)果為陰性。
對(duì)包括LDEV在內(nèi)的多種病原體進(jìn)行廣泛的PCR檢測(cè)，確保對(duì)生產(chǎn)過(guò)程中使用的原材料進(jìn)行嚴(yán)格控制。
使用PCR技術(shù)擴(kuò)增產(chǎn)品中支原體序列，結(jié)果為陰性。
使用BCA方法測(cè)定蛋白濃度。
使用凝膠限度檢查法檢測(cè)產(chǎn)品內(nèi)毒素水平。
產(chǎn)品與培養(yǎng)基1:2比例稀釋后，置于37℃凝膠30分鐘，再加入培養(yǎng)基，產(chǎn)品能在37℃環(huán)境中保持這種形態(tài)5天。
將產(chǎn)品稀釋至 70%含量，在細(xì)胞培養(yǎng)板中滴加50μL，37℃條件下凝膠30分鐘，可以形成穩(wěn)定的凝膠，加入培養(yǎng)基后，在37℃培養(yǎng)箱中能夠保持這種形態(tài)15天。
每批次產(chǎn)品都能夠進(jìn)行瘤細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)和體外血管形成測(cè)試。
使用注意事項(xiàng)
溫度控制
產(chǎn)品在≤-20℃時(shí)是穩(wěn)定的，分裝使用產(chǎn)品以盡可能減少產(chǎn)品的凍融次數(shù)。
請(qǐng)不要儲(chǔ)存在無(wú)霜冰箱中，長(zhǎng)期保存時(shí)請(qǐng)務(wù)必保持產(chǎn)品的凍存狀態(tài)。
產(chǎn)品shouci解凍時(shí)，請(qǐng)將西林瓶包埋在碎冰中，并放置在4℃冰箱中待其融解。
所有接觸產(chǎn)品的耗材，請(qǐng)?zhí)崆敖禍亍?/p>
請(qǐng)您在使用過(guò)程中不要過(guò)長(zhǎng)時(shí)間地用手握住裝有本產(chǎn)品的容具，防止體溫使產(chǎn)品凝膠；若在較短時(shí)間內(nèi)造成產(chǎn)品較為厚重粘稠，您可以將本產(chǎn)品重新置于 0℃ - 4℃ 的環(huán)境內(nèi)1-2 h使其恢復(fù)流動(dòng)性，不影響使用。
避免污染
實(shí)驗(yàn)操作人員需嚴(yán)格區(qū)分實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)、清潔區(qū)和污染區(qū)，確保插取吸頭、加樣、丟棄吸頭的動(dòng)作呈單向流動(dòng)。
其他
產(chǎn)品在每次由冷凍狀態(tài)變?yōu)槿诮鉅顟B(tài)時(shí)，請(qǐng)適當(dāng)搖晃或使用移液器吹吸，確保體系內(nèi)部蛋白分布均勻。
使用方法
模基生物類(lèi)器官基質(zhì)膠主要有四種使用方式，我們將為您提供這四種使用方式的的一般操作程序，您可以基于您的實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇合適的使用方式。
方式 | 方法 | 適用 | 主要應(yīng)用 |
薄層凝膠 | 1. 產(chǎn)品解凍后，適當(dāng)混勻，或根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求使用預(yù)冷的培養(yǎng)基稀釋?zhuān)ㄗh濃度不低于1mg/mL； 2. 向細(xì)胞培養(yǎng)板表面加入50μL/cm2基質(zhì)膠，平鋪均勻，注意避免產(chǎn)生氣泡； 3. 將培養(yǎng)板放置在 37 ℃，等待30 min形成凝膠即可使用，必要時(shí)，吸去上清。 | 細(xì)胞在薄層基質(zhì)凝膠頂部擴(kuò)增 | •細(xì)胞遷移和侵襲 •原代細(xì)胞擴(kuò)增 |
薄層包被 | 1. 產(chǎn)品解凍后，適當(dāng)混勻，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求使用預(yù)冷的培養(yǎng)基稀釋?zhuān)ㄗh濃度不低于0.1mg/mL； 2. 吸取適量體積稀釋液移液，wanquan覆蓋細(xì)胞培養(yǎng)板表面，搖勻，建議包被量為0.01-0.02mg/cm2； 3. 將培養(yǎng)板放置在 37 ℃，孵育至少1h，吸去上清即可使用。 | 細(xì)胞附著在薄層基底膜表面擴(kuò)增 | •原代細(xì)胞擴(kuò)增 |
凝膠包埋 | 1. 產(chǎn)品提前解凍備用； 2. 準(zhǔn)備所需的細(xì)胞，用基質(zhì)膠重懸，建議基質(zhì)膠占比＞70%； 3. 向細(xì)胞培養(yǎng)板表面加入15-20μL/cm2，注意避免產(chǎn)生氣泡； 4. 將培養(yǎng)板放置在 37 ℃，30 min形成包裹細(xì)胞的凝膠，向培養(yǎng)板內(nèi)添加合適的培養(yǎng)基。 | 細(xì)胞在基質(zhì)膠內(nèi)擴(kuò)增、發(fā)育 | •類(lèi)器官培養(yǎng) •瘤球狀體侵襲 |
