產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：
產(chǎn)品英文名稱：Human Activin B Protein, His tag (Animal-Free)
產(chǎn)品中文名稱：重組人激活素B，His標簽無動物源Activin B
規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg
貨號：EY-01X8892
用途：僅供科研研究實驗
特點&優(yōu)勢:
表達宿主:大腸桿菌
種屬:人
序列:氨基酸序列來源于：人源Activin B Protein (Gly293-Ala407) (P09529)
活性:Measure by its ability to induce hemoglobin expression in K562 cells. The ED?? for this effect is <0.7 ng/mL. The specific activity of recombinant human Activin B is > 1.5 x 10? IU
背景
Activin B is the cytokine of the TGF-beta family, which is a 13 kDa protein containing 115 amino acid residues. Activin B has the wide variety of biological function including stem cell differentiation, inflammation, bone remodeling and neural development. They also have a role in regulation of FSH secretion. Activin B induces the phosphorylation of Smad which binds the smad binding element.
本產(chǎn)品具有下列特點:
1.操作簡便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。
2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
操作步驟：
(一)獲得目的基因
1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構(gòu)建重組表達載體
1、載體酶切:將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達質(zhì)粒的表達菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應篩選更多克隆,重復亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。
3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。
(四)誘導表達
1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導的對照組,余下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
公司正在出售的產(chǎn)品：
CGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 0.5mgCGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 ) 軟骨糖蛋白39(多肽)
CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標簽)
FGFR3重組小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
LCN2 Protein Mouse 重組小鼠 LCN2 / NGAL 蛋白
PLAU重組人 Urokinase / PLAU (activated by trypsin) 蛋白 Protein
小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai hepatitis B virus surface aibody (HBsAb) ELISA Kit 人抗乙型肝病毒表面抗體(HBsAb)檢測試劑盒
HumanactivatedproteinCresistance,APCRELISAKit 人活化蛋白C抵抗素(APCR)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforABAb(Rabbitai-braiissueaibody)ELISAKit兔抗腦組織抗體
(0.25%)乙四乙酸混合液100毫升
Mouseneuophilelastase,NEELISAKit小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
血糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
植物可溶性糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
糖原含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
海藻糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
大鼠肺病毒抗體(PV-Ab)檢測試劑盒 ，英文名： PV-Ab ELISA Kit
Porcine tissue inhibitors of metalloproteinase 1 (TIMP-1) ELISA Kit 豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)檢測試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMASP(Humanmannanbindinglectinassociatedserineprotease)ELISAKit人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關絲蛋白酶
體液氧化應激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒50次
ELISAKitCOX-2裸鼠環(huán)加氧酶2
重組人激活素B，His標簽無動物源Activin BFGFR3重組小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 0.5mgCGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 ) 軟骨糖蛋白39(多肽)
PLAU重組人 Urokinase / PLAU (activated by trypsin) 蛋白 Protein
CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標簽)
LCN2 Protein Mouse 重組小鼠 LCN2 / NGAL 蛋白
