Thermo Scientific Pierce NHS 活化磁珠可以通過簡單的混合即用形式將蛋白質(zhì)與磁珠進行共價、胺基偶聯(lián)，以便用于定制的親和純化實驗。

NHS 活化磁珠的特點：

•高容量—與其他供應(yīng)商的 NHS 活化磁珠相比，結(jié)合能力至少高四 倍
• 易于使用—只需極少的手動操作時間，即可在一步式反應(yīng)中固定化
• 安全—不需要有害化學(xué)品（如氰基和溴化氰）
• 配體兼容—可用于通過幾乎任何含有伯胺的化合物或親和配體進行固定化
• 較低的非特異性結(jié)合—微珠表面被預(yù)封閉，任何非反應(yīng)的 NHS-酯基團均被淬滅
• 方案兼容—微珠偶聯(lián)蛋白和下游應(yīng)用可通過手動或自動化（例如，Thermo Scientific KingFisher 儀器）方式執(zhí)行

活化的磁珠含有能與伯胺反應(yīng)以形成穩(wěn)定的酰胺鍵的 N-羥基-琥珀酰亞胺 (NHS) 功能基團。一旦它們共價連接，固定的蛋白會對磁珠表面的浸出具有很高的耐受性。在實驗中使用制備的磁珠時，非特異性結(jié)合可忽略不計，因為在偶聯(lián)程序中，非反應(yīng) NHS-酯基團被封閉。Pierce NHS 活化磁珠可通過手動磁力架或自動平臺（例如，Thermo Scientific KingFisher 儀器）進行偶聯(lián)和處理。

應(yīng)用：
• 用于純化重組蛋白的配體固定化
• 抗體固定化，用于洗脫液中不含抗體污染的免疫沉淀和免疫共沉淀
• 利用腹水、血清和細(xì)胞培養(yǎng)上清液對抗體亞型進行親和純化的二抗固定化

Pierce NHS 活化磁珠為任何所需蛋白質(zhì)偶聯(lián)到磁珠表面提供了一種便利的方式。這一過程不需要危險化學(xué)品或冗長的反應(yīng)方案。磁珠首先與蛋白在 pH 7 到 9 的無胺緩沖液中孵育 1 到 2 小時，以通過 NHS-酯化學(xué)進行共價偶聯(lián)。隨后磁珠被洗滌，任何剩余的活性 NHS-酯基團被淬滅。胺反應(yīng)性化學(xué)及后續(xù)的淬滅可在 3 至 4 小時內(nèi)完成。偶聯(lián)蛋白不會從磁珠表面浸出。此外，由于有效淬滅和包被基底微粒表面的專有封閉試劑，磁珠表現(xiàn)出非常低的非特異性結(jié)合。偶聯(lián)后，制備的磁珠通常用于親和純化程序。