注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通?？梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：酸性磷酸酶（ACP）測(cè)試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
檢測(cè)方法：微量法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6542
產(chǎn)品分類：酯酶系列
商品介紹：
測(cè)定意義: ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機(jī)磷酸，常見于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。 測(cè)定原理： 在酸性環(huán)境中，ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯與4-氨基安替和鐵反應(yīng)生成紅色亞醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通過測(cè)定510nm吸光度增加速率，來計(jì)算ACP活性。 自備儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
1mg 鏈霉親和素 Streptavidin -20℃保存
100mL TABS Buffer,0.2M,pH8.5 TABS Buffer,0.2M,pH8.5 常溫保存
1 管 SURE大腸桿菌 SURE E.coli Strain -80℃保存
2 ug pSecTag 2A pSecTag 2A 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
50次 柱式植物RNA-DNA雙提試劑盒
2 ug pFUW pFUW 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
大豆胨酵母浸粉瓊脂（PYE） Phytone Yeast Extract Agar 250g
2 ug pCMV-SPORT6 TTC1 pCMV-SPORT6 TTC1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
500mL MOPS-SDS Running Buffer,20X MOPS-SDS Running Buffer,20X 常溫保存
20次 即用型藍(lán)白T載體A型（T7-SP6，有MCS） Instant Blue-White Vector T，Type A -20℃保存
2 ug pMito-iRFP pMito-iRFP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
酸性磷酸酶（ACP）測(cè)試盒微量法C11orf65 11號(hào)染色體開放閱讀框65抗體 規(guī)格: 0.2mlRactopamine /PAYLEAN (1B12) 小鼠抗萊克多巴胺單克隆抗體 0.2ml
FSIP1 纖維性鞘結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlKIF11/Eg5/TRIP5 驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體（甲狀激素受體相互作用蛋白5） 規(guī)格: 0.2ml
Ntn1 軸突導(dǎo)向因子1抗體 規(guī)格: 0.1mlTCERG1/CA150 轉(zhuǎn)錄延伸調(diào)節(jié)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
UCHL5IP 泛素羧基末端水解5互相作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlNIPAL2 NIPAL2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Bid BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlASB13 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族13抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Avidin/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格: 2mlCNOT4 細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Solute carrier family 1 溶質(zhì)攜帶物家族-1抗體 規(guī)格: 0.2mlOCEL1 緊密連接蛋白/小分子膠原蛋白OCEL1抗體 規(guī)格: 0.2ml
LACE1 泌升高蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlBAI2/Brain Specific Angiogenesis Inhibitor 2 腦特異性管生成抑制蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.5mlAFP 甲胎蛋白抗體 0.1ml
GPI 糖磷脂酰肌醇抗體 規(guī)格: 0.1mlCD84/SLAMF5 CD84抗體 規(guī)格: 0.1ml
CFTR 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗體 規(guī)格: 0.2mlGFI1B 獨(dú)立生因子1B抗體 規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-human IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1mlHBV pre S1/S2 protein 人乙肝毒pre S1/S2蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
