商品介紹：
本試劑盒是針對細(xì)胞凋亡過程中產(chǎn)生的核小體間DNA鏈斷裂而設(shè)計的?？梢苑浅Ｓ行У爻樘嵝∑螢?80-200bp的DNA ladder，同時又可以抽提到50kb以上的基因組DNA。DNA ladder也稱DNA fragmentation，是細(xì)胞凋亡的一個重要指標(biāo)。通常觀察到DNA ladder，就可以判定細(xì)胞發(fā)生了凋亡。本試劑盒足夠抽提50個細(xì)胞或組織樣品。 試劑盒組份： 樣品裂解液———30ml 蛋白酶K————130μl 10M 醋酸銨——6ml TE——————6ml 注意事項：需自備Tris平衡ben酚、氯仿和無水乙醇。 儲存條件：-20℃，有效期一年。 |
中文名稱：細(xì)胞凋亡DNA斷裂片段提取試劑盒
英文名稱：DNA fragmentation Extraction Kit
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品貨號：LZ-01X6325
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、實驗效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
脂肪合成(FASN)英文名稱：FASN ELISA KitASTE1蛋白抗體包裝25g
脂多糖/內(nèi)毒(LPS)英文名稱：LPS ELISA Kit磷化自噬相關(guān)蛋白4B抗體包裝500g
脂蛋白脂(LPL)英文名稱：LPL ELISA Kit微絲相關(guān)蛋白1抗體包裝5g
脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PL-A2)英文名稱：Lp-PL-A2 ELISA Kit腺苷A1A受體抗體包裝5g
脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PLA2)英文名稱：Lp-PLA2 ELISA Kit芳基硫酯B抗體包裝25g
脂蛋白α(Lp-α)英文名稱：Lp-α ELISA Kitγ基丁轉(zhuǎn)抗體包裝5g
正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)英文名稱：RANTES/CCL5 ELISA Kit共濟(jì)失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
整合αM(Itgam/CD11b)英文名稱：Itgam/CD11b ELISA Kit腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換包裝1g
整合α-IIb(Itga2b/CD41)英文名稱：Itga2b/CD41 ELISA Kit芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白2抗體包裝250mg
整合α5(Itgax/CD11c)英文名稱：Itgax/CD11c ELISA KitAlkB同源蛋白8抗體包裝25g
長停滯特異性基因產(chǎn)物6(gas-6)英文名稱：gas-6 ELISA KitABI基因家族成員3結(jié)合蛋白抗體包裝5g
粘蛋白/粘液7(MUC7)英文名稱：MUC7 ELISA KitRho GTP激活蛋白20抗體包裝250mg
粘蛋白/粘液5B(MUC5B)英文名稱：MUC5B ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族10抗體包裝500g
粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)英文名稱：MUC5AC ELISA Kit乙脫氫1蛋白家族L1抗體包裝25g
粘蛋白/粘液2(MUC2)英文名稱：MUC2 ELISA Kit軸抑制蛋白2抗體包裝5g
gp130結(jié)合蛋白GAM抗體基質(zhì)金屬蛋白9(MMP9)Lumacaftor (VX-809; VRT 826809) 是 CFTR 調(diào)節(jié)劑，可糾正 CFTR 蛋白的折疊和運(yùn)輸。
細(xì)胞凋亡DNA斷裂片段提取試劑盒暗孢節(jié)菱孢 鞣花酸5-羥色轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白Elisa
鴨艾耳球蟲 鞣花酸5脂加氧Elisa
就地堆肥地芽孢桿 鹽侖特羅6酮酰四氫蝶呤合Elisa
大腸桿987P因子血清 異丁香甲6酮前列腺Elisa
異配囊接霉卵孢變種 潑龍6酮前列腺F1aElisa
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 波姆934P70kDa熱休克蛋白5Elisa
釀酒酵母 小豆蔻明8-羥基鳥DNA糖苷Elisa
白黃小脆柄菇 酮麝香8羥基脫氧鳥苷Elisa
泡盛曲霉 低密度聚乙烯8異前列腺Elisa
雜色曲霉原變種 頭鈉8-異前列腺F2αElisa
枯草芽孢桿 長葉烯Ⅰ型膠原C端肽Elisa
牛邊緣無漿體（獨山株） 血管緊張IIⅠ型膠原N末端肽Elisa
麥芽糖假絲酵母 惡唑Ⅰ型膠原α1Elisa
首爾鏈霉 2-O-α-D-吡喃葡糖基-L-抗壞血酸Ⅰ型膠原吡啶交聯(lián)終肽Elisa
異常漢遜酵母 莫諾苯宗Ⅰ型前膠原C末端肽Elisa
