商品介紹：
測定意義: 海藻糖是功能性低聚糖，具有非還原性、保濕性、熱酸穩(wěn)定性、抗凍結(jié)性等特性，是細(xì)胞在不良環(huán)境條件下產(chǎn)生的一種重要的抗逆應(yīng)激物之一，它對生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護(hù)作用。海藻糖合成酶（Trehalose Synthase）催化麥芽糖合成海藻糖，是海藻糖生物合成的關(guān)鍵途徑之一。 測定原理： TS催化麥芽糖產(chǎn)生海藻糖，使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖，通過葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖含量，按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。 需自備的儀器和用品： 分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6721 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋，即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ) Columbia Blood Agar Base 250g
100g Cholesterol 室溫保存
50T 埃立克體PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
100mL 咪唑溶液，2M Imidozol Solution 常溫保存
2 ug pWB980 pWB980 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
10次 Southern級細(xì)菌(G+)DNAout
2 ug pESC-LEU pESC-LEU 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
RSMA培養(yǎng)基 250g
10g L- 纈 L-Valine 室溫保存
50T 轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
5 g 蛋白去除試劑M Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測試盒微量法Donkey Anti-Goat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-rabbit IgG 小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 1mg
C1orf83 1號染色體開放閱讀框83抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rat secretory IgA 分泌型免疫球蛋白A抗體 規(guī)格: 0.2ml
MFSD2A 促進(jìn)調(diào)解蛋白家族2A抗體 規(guī)格: 0.2ml
EGF 表皮生因子抗體（大鼠） 規(guī)格: 0.1ml
phosphor-Caldesmon(Ser789) 磷酸化鈣介質(zhì)素抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-dog IgG/Bio 標(biāo)記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.3ml
SMYD4 組蛋白甲基轉(zhuǎn)移SMYD4抗體 規(guī)格: 0.2ml
HSJ2/DNAJB6 熱休克蛋白J2抗體 規(guī)格: 0.2ml
CK10 細(xì)胞角蛋白10抗體 規(guī)格: 0.1ml
HLA G(C-terminal) 人類白細(xì)胞抗原G抗體（C端） 0.1ml
