本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
還原糖含量測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6737 |
商品介紹：
測定意義: 還原糖廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中。植物體內(nèi)的還原糖主要包括葡萄糖、果糖和麥芽糖等，是最常見的單糖和雙糖，其中葡萄糖和果糖不僅是呼吸作用的主要底物，也是進一步合成蔗糖、淀粉和纖維素的底物。 測定原理： 加熱促進堿性溶液中3,5-二硝基水楊酸溶液與還原糖生成棕紅色氨基化合物，在540nm有特征吸收峰；在一定的濃度范圍內(nèi)，還原糖含量與540nm吸光度成線性關(guān)系，根據(jù)標準曲線，即可求出樣品中還原糖的量。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
實驗結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
2 ug pSP64 pSP64 低溫運輸，-20℃保存
400U RNase抑制劑（人源） Human RNase Inhibitor -20℃保存
2 ug pCMV-SPORT6 PPP2R3A pCMV-SPORT6 PPP2R3A 低溫運輸，-20℃保存
Preston肉湯基礎(chǔ) Preston Broth Base 250g
25mg 多聚 -L- 賴 (7-15 萬 ) Poly-L-Lysine -20℃保存
50T 人注意缺陷多巴胺載脂蛋白基因多態(tài)性PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
5 g L-Arginine（NO前體） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250ml E. Coli Lysis Buffer E. Coli Lysis Buffer 常溫保存
100mL SSPE溶液,20× SSPE, 20× 常溫
2 ug PINDCSPD PINDCSPD 低溫運輸，-20℃保存
亞碲酸鉀血瓊脂基礎(chǔ) Potassium Tellurite Blood Agar Base 250g
還原糖含量測試盒微量法GIMAP7 GTPIMAP家族成員7抗體 規(guī)格: 0.2mlC2orf68 2號染色體開放閱讀框68抗體 規(guī)格: 0.2ml
CCDC70 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體 規(guī)格: 0.2mlTRIM29/ATDC 共濟失調(diào)毛細管擴張癥D相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
PSGD/HOXB13 同源盒蛋白HOXB13抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-HDAC7 (Ser318) 磷酸化組蛋白去乙?；?抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlIL-13Ra1 白細胞介素-13受體a1抗體 規(guī)格: 0.1ml
procollagen type IIA Ⅱ型膠原α1抗體 規(guī)格: 0.2mlDDB1 DNA損傷結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5 Cy5標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格: 0.1mlSkp2/skp2 p45 細胞S期激相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-human IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.3mlphospho-HRH1(Ser398) 磷酸化組胺受體H1抗體 規(guī)格: 0.1ml
TRAF1 瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體 規(guī)格: 0.2mlDog IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗犬IgM抗體 規(guī)格: 0.1ml
ANKRD50 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-Goat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
NUDC 細胞核分離基因C蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-FGFR1 (Tyr307) 磷酸化堿性成纖維細胞生因子受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml
HRH3/GPCR97 組織胺H3受體抗體 規(guī)格: 0.1mlPCDHB4 原鈣粘蛋白β4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-cdc25A (Ser178) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體 規(guī)格: 0.1ml
