【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
產(chǎn)品名稱：激活素A(ACVA)測(cè)定試劑盒免費(fèi)代測(cè)
英文名稱：ACVA (Activin A) ELISA Kit
規(guī)格：48T/96T
貨號(hào)：XG-E63212
需自備試劑和器材：
1． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
2． 自動(dòng)洗板機(jī)。
3.  37℃恒溫箱。
4． 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測(cè)樣品較多時(shí)**用多通道移液器。
5． 干凈的試管和 Eppendof 管。
6． 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS   配法為：1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。0.01 M PBS（pH7.2-7.6）  配法：1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽，應(yīng)加上分子式中水的含量。
9.  蒸餾水
10.  吸水紙

樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。  
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min； 
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）備注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第 5 步封閉。 
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜； 
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的*化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min； 
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30min； 
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。

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人Agouti相關(guān)蛋白(AgRP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human AgRP (Agouti Related Protein) ELISA Kit

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人促血管生成素1(ANG1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit

人促血管生成素2(ANG2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit

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人骨成型蛋白4 (BMP-4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  Human BMP-4 (Bone Morphogenetic Protein 4) ELISA Kit

人骨成型蛋白7 (BMP-7)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  Human BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) ELISA Kit

人上皮型鈣黏蛋白 (E-Cad)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  Human E-Cad (E-Cadherin) ELISA Kit

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激活素A(ACVA)測(cè)定試劑盒免費(fèi)代測(cè)巴卡丁 III（標(biāo)準(zhǔn)品）Baccatin III ：27548-93-2 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

*（標(biāo)準(zhǔn)品）Cilostazol ：73963-72-1 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

多烯*無水/*（標(biāo)準(zhǔn)品）Docetaxel anhydrous ：114977-28-5 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

*鈉Fosfomycin sodium ：26016-99-9 質(zhì)量規(guī)格：>96%

*（標(biāo)準(zhǔn)品）Levetiracetam ：102767-28-2 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

*Olanzapine ：132539-06-1 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

白藜蘆醇（標(biāo)準(zhǔn)品）Resveratrol ：501-36-0 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品

*(標(biāo)準(zhǔn)品)Tacrolimus /FK506 monohydrate ：109581-93-3 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

重長(zhǎng)春瑞賓(標(biāo)準(zhǔn)品)Vinorelbine Tartrate ：125317-39-7 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

乙酰*Acetylspiramycin ：24916-51-6 質(zhì)量規(guī)格：>1200u/mg,CP2005

*（標(biāo)準(zhǔn)品）Cyclophosphamide ：6055-19-2 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

格列吡 Glipizide ：29094-61-9 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

鹽酸*Ambroxol HCl ：23828-92-4 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

D-半乳糖醛酸(標(biāo)準(zhǔn)品)D-Galacturonic acid ：91510-62-2 質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定；一水物

*(標(biāo)準(zhǔn)品)Duloxetine hcl ：136434-34-9 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl（樣品終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。