技術(shù)原理：
DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
尖孢鐮刀菌PCR檢測試劑盒植物病原規(guī)格 | Fusarium oxysporumPCR() | BK-P9191 |
原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
?
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
芬布芬 CAS 36330-85-5 * 規(guī)格： 100mg
1,3-萘二酚 CAS 132-86-5 * 規(guī)格： 50mg
芥酸鹽 CAS 7431-77-8 * 規(guī)格： 20mg
α-細辛腦 CAS * 規(guī)格： 100mg
對羥基苯乙 CAS * 規(guī)格： 20mg
來米特 CAS 75706-12-6 * 規(guī)格： 100mg
麥迪 CAS 35457-80-8 * 規(guī)格： 200mg
蘆薈大黃素 CAS 1415-73-2 * 規(guī)格： 20mg
奈芬 CAS * 規(guī)格： 100mg
大黃酚 CAS 481-74-3 * 規(guī)格： 20mg
銀杏內(nèi)酯J; 白果苦內(nèi)酯J CAS 107438-79-9 * 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支
3-O-b-D-葡萄糖( 1→4)-[ CAS 68027-14-5 * 規(guī)格： HPLC≥98%;5mg/支
膽酸 CAS 81-25-4 * 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支
甘草素;甘草醇 CAS 578-86-9 * 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支
葫蘆巴堿 CAS 535-83-1 * 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支
尖孢鐮刀菌PCR檢測試劑盒植物病原規(guī)格2,3-二甲酸 2,3- two piperidine formic acid*：8249-15-3分子量：
2-三氟甲氧氯 196.55 2- three, f*：450-96-4分子量： C7H4ClF3O
1--3-硝 249.01 1- -3-*：645-00-1分子量： C6H4INO2
1-(對)萘 233.31 1- (p-tolyl-amino) naphthalene*：634-43-5分子量： C17H15N
2-甲-5-甲氧并噻唑 179.24 2甲- 5 -甲氧并噻唑*：2941-69-7分子量： C9H9NOS
黃芪甲苷 Astragalus saponins 784.97022分子量：C41H68O14*：83207-58-3，84687-43-4
4-溴-1，2-(亞甲二氧) 201.02 4- -1, 2- (Ya Jiaji two) benzene*：2635-13-4分子量： C7H5BrO2
1,4-二乙 134.22 1,4- two ethyl benzene*：105-05-5分子量： C10H14
4-(Boc-)-1-[(2-羥)(噻吩-2-)甲] 388.529 4- (Boc- -) -1-[(2- hydroxyphenyl) (thiophene -2-) methyl] piperidine*：870703-80-3分子量： C21H28N2O3S
糠醛 Furfural 96.08分子量： C5H4O2*：35796
直接紅81 Direct red 81 675.6分子量： C29H19N5Na2O8S2*：259636
