注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時間不夠，可以延長反應(yīng)時間（反應(yīng)時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：木質(zhì)素過氧化物酶（LiP）測試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
檢測方法：微量法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6948
產(chǎn)品分類：其它系列
商品介紹：
測定意義: 木質(zhì)素過氧化物酶（EC1.11.1.14）是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶，屬于木質(zhì)素降解酶系，在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應(yīng)用潛力。 測定原理 木質(zhì)素過氧化物酶催化天青脫甲基，在651nm處測定吸光值減少。 自備實驗用品及儀器 天平、研缽、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
1瓶 TG-905細(xì)胞株 TG-905 低溫運(yùn)輸和保存
MKTTn肉湯（ISO） MKTTn Broth 250g
100UN β- 葡萄糖苷 β-Glucosidase 4℃保存
50T 副傷寒桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
5g 纖維二糖 D-(+)-Cellobiose 室溫保存
2 ug SuperTopFlash SuperTopFlash 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
1只 硅膠膜離心吸附柱（大提）收集管
2 ug pAcGFP-N1 pAcGFP-N1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
玫瑰紅鈉瓊脂平板（9cm） Rose Bengal Medium 10個/包
1瓶 Bel-7402細(xì)胞株 Bel-7402 低溫運(yùn)輸和保存
Fraser顆粒 Fraser Medium 300ml/袋*10
木質(zhì)素過氧化物酶（LiP）測試盒微量法UBE2U 泛素蛋白連接U抗體 規(guī)格: 0.2ml
Ube2G2/UBC7 泛素蛋白連接G2抗體 規(guī)格: 0.2ml
CDKN2A/P16 抑基因p16抗體 規(guī)格: 0.1ml
ICAD/DFF-45 Beta Caspase激活的脫氧核糖核酸抑制劑抗體 規(guī)格: 0.1ml
XAGE2 瘤/睪抗原12家族2抗體 規(guī)格: 0.2ml
RALA Ras樣蛋白A抗體 規(guī)格: 0.2ml
PCDHB16 原鈣粘蛋白16抗體 規(guī)格: 0.2ml
TRAC1/RNF125 環(huán)指蛋白125抗體 規(guī)格: 0.2ml
RGS2 G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cytomegalovirus pp65 巨細(xì)胞毒PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Mink IgG/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Smad3(Ser423/425) 磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 規(guī)格: 0.1ml
