流式細(xì)胞檢測樣本的制備介紹
流式細(xì)胞術(shù)對細(xì)胞的分析檢測必須基于單細(xì)胞的基礎(chǔ)上，是流式細(xì)胞術(shù)的基本要求。因此就必須把待檢測的 外周血、 實(shí)體組織 等樣本 制備成單細(xì)胞懸液。在應(yīng)用中，制備出合格的單分散細(xì)胞 是流式細(xì)胞術(shù)樣本制備技術(shù)中重要的一環(huán)。它要求這種分散細(xì)胞的方法既要使細(xì)胞成為單個細(xì)胞，又能保持細(xì)胞的固有生物化學(xué)成分及生物學(xué)特性。流式細(xì)胞術(shù)樣品制備大致可分為下面五個步驟：
①取材必須具有代表性，如取手術(shù)腫瘤組織，必須取瘤細(xì)胞生長旺盛部位， 組織等標(biāo)本必須在取材后保持樣 本的新鮮，一般 在室溫 1 個小時之內(nèi)處理好樣本或及時用固定劑或 28 ℃低溫 對組織進(jìn)行保存；
②對細(xì)胞的待測生物化學(xué)成分進(jìn)行熒光染色，制成合適的單細(xì)胞懸液；
③按照廠家提供的軟件程序?qū)颖具M(jìn)行獲取、檢測和存儲；
④再依照軟件提供的程序?qū)z測結(jié)果進(jìn)行檢測分析；
⑤檢測分析結(jié)果在生物、 醫(yī)學(xué)上的意義進(jìn)行分析和評價。
流式細(xì)胞檢測樣本的制備
原理與操作：
樣本制備儀是是一套安全的，標(biāo)準(zhǔn)化的樣本制備系統(tǒng)，可對植物或動物的實(shí)體組織進(jìn)行自動機(jī)械分離，為流式分析、細(xì)胞培養(yǎng)、或 DNA 擴(kuò)增技術(shù)提供高質(zhì)量的樣本。整套系統(tǒng)對操作人員的技術(shù)要求不高，而且可對各種類型的組織實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化的樣本處理。目前常見的制備儀有 BD 的 Medimachine 系統(tǒng)、圣泰科（Syntec）的 MediMachineII 單細(xì)胞懸液制備系統(tǒng)、美天旎的 GentleMACS 全自動組織處理器。
其原理可簡述成下列三點(diǎn)：
① 首先將獲得的組織除去脂肪和壞死部分，剪成 10mm3左右的小塊和緩沖液（比如 PBS ）一起放入儀器倉中。
② 啟動儀器，根據(jù)組織的類型和你所需細(xì)胞懸液的要求選擇儀器運(yùn)作的時間（從10 秒到 4 分鐘不等），對于任何一種組織 和所需的細(xì)胞懸液分離的時間都可以標(biāo)準(zhǔn)化，并適用于各個實(shí)驗(yàn)室。
③ 組織被分離后，選擇合適的孔徑篩網(wǎng)來純化細(xì)胞懸液，過濾后的懸液將會進(jìn)入儀器底部的收集區(qū)域。此時可用注射器收集區(qū)內(nèi)回收我們所需的單細(xì)胞懸液，完成檢測樣本的制備。
