| 形態(tài)特性 | 上皮細(xì)胞樣 | ||
| 生長特性 | 貼壁生長 | ||
| 特征特性 | BEL-7402細(xì)胞株是1974年從臨床肝癌手術(shù)標(biāo)本中建立的。 細(xì)胞群體倍增時(shí)間為20小時(shí)。 移植到處理過的wistar大鼠中的能形成腫瘤結(jié)節(jié)。 細(xì)胞形態(tài)呈上皮樣細(xì)胞。 在電子顯微鏡下亦顯示上皮細(xì)胞所具有的橋粒和張力原纖維，與臨床肝癌細(xì)胞相似。 分瓶培養(yǎng)第四天時(shí)，其有絲分裂指數(shù)約為7%。 BEL-7402細(xì)胞的染色體數(shù)為不足三倍體，有一個(gè)異常的近端著絲點(diǎn)染色體。 間接免疫熒光法測(cè)BEL-7402細(xì)胞內(nèi)的AFP為陽性反應(yīng)。 LDH同工酶譜顯示與成年人肝細(xì)胞不同，而與人胚肝及臨床肝癌相近。 | ||
| 培養(yǎng)條件 | RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10% | ||
| 傳代方法 | 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 | ||
| 傳代情況 | PN | ||
| 凍存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS | ||
安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后，在倒置鏡下（4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況。
(一)如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟操作如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明，收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。
注意事項(xiàng)：
1、觀察細(xì)胞要在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。
2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們。
【本平臺(tái)合作項(xiàng)目】
慢病毒，腺病毒，RNAi類，分子生物實(shí)驗(yàn)，病理實(shí)驗(yàn)，免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn)等，能夠進(jìn)行藥效學(xué)評(píng)價(jià)、毒理學(xué)評(píng)價(jià)、細(xì)胞藥篩、動(dòng)物建模、病理檢測(cè)、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測(cè)序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析服務(wù)！
