生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái)，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。
中文名稱：PAGE膠微量蛋白染色試劑盒(可脫色)
英文名稱：PAGE protein staining kit
產(chǎn)品規(guī)格：250ml|1000ml
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號(hào)：BJ-F0164912
產(chǎn)品介紹：
本試劑盒適用于快速檢測(cè)PAGE膠上的微量蛋白質(zhì)，它的敏感度幾乎可以達(dá)到銀染的敏感度（ng級(jí)水平或者更高），但是比銀染簡(jiǎn)單、穩(wěn)定、重復(fù)性高。染色液所含有的成份和PAGE膠中的SDS、TRIS共同作用形成特殊復(fù)合物沉淀在膠基質(zhì)中形成白色的背景染色。有蛋白的地方，蛋白質(zhì)的存在干擾這種復(fù)合物沉淀的形成，因此蛋白條帶仍舊保持透明無(wú)色，在黑色的背景下，就可以清晰見(jiàn)到透明的蛋白條帶。 產(chǎn)品特點(diǎn)： 1.電泳后采用兩個(gè)簡(jiǎn)單步驟，15分鐘內(nèi)完成全部過(guò)程。 2.環(huán)保染料，*不含有各種醋酸、甲醇等有毒有刺激性成份。 3.蛋白條帶為不透明白背景上的透明條帶，靈敏度為傳統(tǒng)方法的10倍以上（納克級(jí)或者更高）。 4.可逆染色，*不影響蛋白性質(zhì)，不影響抗體抗原結(jié)合性質(zhì)。如果需要可以脫色15分鐘后繼續(xù)做蛋白電洗脫（切下特定條帶脫色后洗脫下來(lái)可以用來(lái)做抗原使用）、定量、Western blot實(shí)驗(yàn)、質(zhì)譜分析、N末端測(cè)序等。 5.在普通雙蒸水中可以保留一年以上，不退色，縮小，蛋白質(zhì)不擴(kuò)散，一年后依然可以用來(lái)做Western blot等蛋白微分析。 操作步驟： 1. 染色 1) 電泳后用清水沖洗膠30-60 秒鐘，然后將PAGE 膠放置于一個(gè)透明的玻璃培養(yǎng)皿中，根據(jù)膠大小倒入適量的染色液（確保膠都浸沒(méi)在染色液內(nèi)，20-25ml 足夠染色一塊普通的8×10cm mini 膠了），搖床上輕搖染色10-15 分鐘(10-15%膠15 分鐘，5-7.5%膠可縮短時(shí)間到10 分鐘)。 2) 倒棄染色液，加入20-25ml 的顯色液，立刻同時(shí)用手輕搖膠顯色0.5-1 分鐘（將透明培養(yǎng)皿放在一個(gè)黑色（暗）背景上觀察條帶出現(xiàn)情況，此時(shí)在不透明的白背景上應(yīng)該看到透明的蛋白條帶，不要顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，過(guò)長(zhǎng)反而會(huì)降低分辨率）。 3) 看到滿意條帶后，用清水沖洗1-2 分鐘后，放置于蒸餾水中保存。 2. 脫色 1) 根據(jù)個(gè)人需要將所需目的條帶切下后或者直接整塊膠加入適量脫色液，搖床上輕搖10 分鐘或者直到脫色*，后用清水沖洗幾次。 2) 現(xiàn)在膠可以用于蛋白電洗脫，Western blot 等操作，或者可以再用傳統(tǒng)方法染色。 儲(chǔ)存條件：室溫避光，有效期12個(gè)月。 本制品別名：可逆微量蛋白染色試劑盒|敏感可脫色PAGE膠蛋白染色試劑盒 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫(xiě)明樣本的種類(lèi)、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專(zhuān)用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專(zhuān)人(2人)運(yùn)送，不得郵寄，最好使用專(zhuān)車(chē)。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的，需在4℃冰箱短時(shí)間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時(shí)不穩(wěn)定，故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
人轉(zhuǎn)鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液
人血液免疫球蛋白G（IgG）免疫比濁法定量檢測(cè)試劑盒
G標(biāo)準(zhǔn)溶液
人血液免疫球蛋白M（IgM）免疫比濁法定量檢測(cè)試劑盒
M標(biāo)準(zhǔn)溶液
小鼠圍脂滴蛋白4(PLIN4)elisa ，英文名： PLIN4 ELISA Kit
兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T
牛胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(PGF)免疫試劑盒 Bovine Placea growth factor,PGF ELISA kit
英文名稱HumanAmphiregulinELISAKit人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(AR)規(guī)格：96T/48T
調(diào)料比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
RatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKelisa大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白(AMPK)elisa規(guī)格：96T/48T
PAGE膠微量蛋白染色試劑盒(可脫色)小鼠肌鈣蛋白I（cTnI）elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(ARPC4)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠饑餓素(GHRL)elisa檢測(cè)試劑盒
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
