新學(xué)期開(kāi)學(xué)*,現(xiàn)貨供應(yīng):A9 細(xì)胞,小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞價(jià)格,詳細(xì)信息:
【細(xì)胞生長(zhǎng)】:貼壁生長(zhǎng)或懸浮生長(zhǎng)
【細(xì)胞形態(tài)】:上皮樣、多形態(tài)細(xì)胞樣等形態(tài)
【規(guī)格】:5×1000000cells/瓶
【包裝】:內(nèi)層無(wú)菌自封袋、防壓泡沫盒、外層防壓保溫氣泡袋、說(shuō)明書(shū)。
【價(jià)格】:電詢(xún)/詢(xún)價(jià)。(或)
【發(fā)票】:增票/普票
【細(xì)胞傳代】:1:3 傳代
【細(xì)胞活力】:90%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
【細(xì)胞檢測(cè)】:細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
【細(xì)胞凍存】:液氮凍存(基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)
新學(xué)期開(kāi)學(xué)*,現(xiàn)貨供應(yīng):“A9 細(xì)胞,小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞價(jià)格 ”優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品后,在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況:
如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(達(dá)80-90%),即可進(jìn)行傳代,具體步驟如下:
1)棄去培養(yǎng)液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶?jī)?nèi)加入1.0-2.0ml*液,再倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺(tái),吸取*,加含有6ml含10%的血清的培養(yǎng)液,輕輕吹打細(xì)胞。
3)加入等量的培養(yǎng)液,輕輕吹打混勻后吸出一半,分到新別的地方培養(yǎng)。
新學(xué)期開(kāi)學(xué)*,現(xiàn)貨供應(yīng):--上海瑞齊生命科學(xué)有限公司其他相關(guān)細(xì)胞:
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新學(xué)期開(kāi)學(xué)*,現(xiàn)貨供應(yīng);技術(shù)相關(guān)問(wèn)答:
1、培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5 % 或10% CO2?或根本沒(méi)有影響?
一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作為pH 的緩沖系統(tǒng), 而培養(yǎng)基中NaHCO3 的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2 濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 含量為每公升3.7 g 時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10 % CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 為每公升1.5 g 時(shí), 則應(yīng)使用5 % CO2 培養(yǎng)細(xì)胞。
2、何時(shí)須更換培養(yǎng)基?
視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定, 或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。
3、培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?
除于特殊篩選系統(tǒng)中外, 一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下, 培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
4、附著性細(xì)胞繼代時(shí)所使用之trypsin-EDTA 濃度?應(yīng)如何處理?
一般使用之trypsin-EDTA 濃度為0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。*次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中, 保存于–20 ℃,避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin 之活性降低, 并可減少污染之機(jī)會(huì)。
5、懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?
一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中, 稀釋細(xì)胞濃度即可, 若培養(yǎng)液太多時(shí), 可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高, 直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶, 加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度, 重復(fù)前述步驟即可。
6、欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?
欲回收動(dòng)物細(xì)胞, 其離心速率一般為300xg (約1,000rpm),5 - 10 分鐘, 過(guò)高之轉(zhuǎn)速, 將造成細(xì)胞死亡。
7、細(xì)胞之接種密度為何?SHZ-88大鼠乳腺癌細(xì)胞
依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤(pán)之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)之一重要原因。
8、細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?
動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)zui常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5 - 10 %DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95 % 原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO 稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能, 故不可將DMSO 直接加入細(xì)胞液中, 必須使用前先行配制完成。
9、DMSO 之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何?SHZ-88大鼠乳腺癌細(xì)胞
a D2650), 其本身即為無(wú)菌狀況, *次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中, 保存于4°C, 避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO 之裂解而釋出有害物質(zhì), 并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過(guò)濾DMSO, 則須使用耐DMSO 之Nylon 材質(zhì)濾膜。
10、冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase *儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase*儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
11、細(xì)胞欲冷凍保存時(shí), 細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?
冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x106 cells/ml vial, 融合瘤細(xì)胞則以5x106 cells/ml vial 為宜。
12、應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類(lèi)可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法。
13、如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?SHZ-88大鼠乳腺癌細(xì)胞
加入相應(yīng)抗生素。直接滅菌后丟棄之。
14、支原體(mycoplasma) 污染的細(xì)胞, 是否能以肉眼觀察出異狀?
不能。除極有經(jīng)驗(yàn)之專(zhuān)家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株,無(wú)法以其外觀分辨之。
15、支原體污染會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有何影響?
支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞之生長(zhǎng)參數(shù), 代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-free,實(shí)驗(yàn)結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義。
26、CO2 培養(yǎng)箱之水盤(pán)如何保持清潔?
定期(至少每?jī)芍芤淮危?以無(wú)菌蒸餾水或無(wú)菌去離子水更換之。
27、為何培養(yǎng)基保存于4 ℃ 冰箱中, 顏色會(huì)偏暗紅色, 且pH值會(huì)越來(lái)越偏堿性?
培養(yǎng)基保存于4 ℃ 冰箱中, 培養(yǎng)基內(nèi)之CO2 會(huì)逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來(lái)越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red) 的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果, 將造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí), 可以通入無(wú)菌過(guò)濾之CO2, 以調(diào)整pH 值。