現(xiàn)貨供應(yīng)：WEHI-3細(xì)胞,小鼠血液細(xì)胞價格產(chǎn)品經(jīng)無數(shù)次市場驗(yàn)證，若出現(xiàn)質(zhì)量問題（非人為的）可無條件換貨或退貨,詳細(xì)信息：
規(guī)格：70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶
特點(diǎn)：細(xì)胞代數(shù)為4-5代左右
細(xì)胞檢測：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
收到“WEHI-3細(xì)胞,小鼠血液細(xì)胞價格”后應(yīng)如何去正確的處理：
您需要準(zhǔn)備好細(xì)胞所要用到的培養(yǎng)基和相關(guān)試劑,雖然所有的貼壁,半貼壁或者懸浮細(xì)胞處理方式差不多,但是不同的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)條件和處理力度還有試劑的批間差這些問題存在,也會導(dǎo)致對細(xì)胞處理不當(dāng),或者環(huán)境的不適應(yīng)而造成細(xì)胞的死亡。
1） 收到細(xì)胞,*時間要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,對于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細(xì)胞密度,有疑議及時咨詢提供細(xì)胞的技術(shù)人員。由于運(yùn)輸?shù)?時間或者溫度的變化,很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的 培養(yǎng)基瓶子里面,會發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞聚集在一起,但是細(xì)胞生長還是正常的,通過離心收集,加以*的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。
2） 當(dāng)通過上一步的觀察,細(xì)胞初步?jīng)]有任何問題時,進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時,則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL 培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。細(xì)胞在低于正常生長溫度情況下,會調(diào)整為靜止期,或者慢速生*,必須恢復(fù)37 度的環(huán)境至少3個小時左右,才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生*的狀態(tài),在對數(shù)生*進(jìn)行細(xì)胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細(xì)胞的存活率。
3）如果經(jīng)*步觀察發(fā)現(xiàn)“”密度超過90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時,則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細(xì)胞 可 以一次多傳幾瓶；對于生長較慢,細(xì)胞比較薄,狀態(tài)容易波動的細(xì)胞類型,一次少傳些,保證每瓶細(xì)胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細(xì)胞,*次 處理也可以依照第二種情況。
售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真或致銷售人員，我們將盡快為您解決。
操作方法
固定 | 培養(yǎng)細(xì)胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進(jìn)行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。 |
反應(yīng) | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加反應(yīng)液（每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標(biāo)記的-dUTP 1μL），使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細(xì)胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。 |
終止反應(yīng) | 去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。 |
FITC標(biāo)記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。 |
PI復(fù)染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。 |
交貨時間 | 10~15天 |
客戶須知（對材料的要求、注意事項(xiàng)）
結(jié)果提供：正常和陽性對照玻片及其1張數(shù)碼照片，剩余石蠟塊，檢測報告；
樣本要求：取材保持組織新鮮（組織塊以小于2cm×1.5cm×0.3cm為宜），立即放入固定液中（固定液用10%福爾馬林液或4%多聚甲醛緩沖液，體積為組織塊的10倍以上），避免干燥；對于有血跡的樣本，可用PBS液或生理鹽水沖洗后直接放入固定液中；經(jīng)固定后的樣本必須在48小時內(nèi)處理。
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