淀粉總量檢測(cè)試劑盒庫(kù)號(hào)：M189312淀粉總量檢測(cè)試劑盒庫(kù)號(hào)：M189312
愛(ài)爾蘭Megazyme淀粉總量檢測(cè)試劑盒型號(hào):K-TSTA
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淀粉測(cè)定方法可以分為酸水解法和酶法分析法。酸水解只能應(yīng)用于純淀粉樣品。酶法分析方法在前處理步驟，淀粉凝膠化，液化和糊化，糊精水解成葡萄糖，葡萄糖測(cè)定步驟等方面存在不同。AACC法76-11詳細(xì)描述了淀粉在高壓蒸汽滅菌鍋中及含水的條件下凝膠化，并用淀粉葡糖苷酶將淀粉轉(zhuǎn)化為葡萄糖，再測(cè)定葡萄糖含量。AACC法76-11使很多樣品和材料的淀粉含量被低估，這些樣品包括高直鏈淀粉玉米淀粉和許多加工過(guò)得谷物制品。目前，很多方法在淀粉凝膠化的過(guò)程中后立即結(jié)束后加入耐熱α-淀粉酶處理。對(duì)于難以凝膠化的樣品如高直鏈淀粉玉米淀粉，采用氫氧化鈉或DMSO。在膳食纖維的測(cè)定方法中為取保淀粉完溶解，Englyst和Cumming（1988）加入了淀粉脫支化酶，普魯蘭酶。為了滿足樣品中總淀粉含量的定量測(cè)定的需要，Megazyme公司研發(fā)了一種使用耐熱α-淀粉酶和淀粉葡糖苷酶的淀粉總量試劑盒。這個(gè)方法已被AOAC和AACC采用。近來(lái)，我們改進(jìn)了方法，使耐熱α-淀粉酶和淀粉葡糖苷酶孵育過(guò)程可以相同的pH(pH 5.0)下進(jìn)行，可樣簡(jiǎn)化了測(cè)定步驟，并將麥芽***糖生成的可能性降到低。Megazyme淀粉總量試劑盒可測(cè)定大部分食品，飼料，植物和谷物制品（天然或加工過(guò)的）。對(duì)于大部分樣品（如小麥粉），淀粉在樣品孵育中（大約100℃，并加入耐熱α-淀粉酶）完溶解。含有大量抗性淀粉的樣品（如高直鏈淀粉玉米淀粉），需要用2M KOH或熱DMSO進(jìn)行預(yù)溶解。含有可溶性淀粉或麥芽糊精的樣品，不需要用耐熱α-淀粉酶處理。原理：耐熱α-淀粉酶水解淀粉為可溶性分支和無(wú)支的麥芽糊精（1）如有必要，樣品中的抗性淀粉可加入4℃的2M KOH并攪拌進(jìn)行預(yù)溶解，并用醋酸鈉緩沖液中和，再用α-淀粉酶處理（2）。也可用100℃的DMSO溶解。淀粉葡糖苷酶（AMG）定量水解麥芽糊精成D-葡萄糖（3）D-葡萄糖被氧化成D-葡萄酸鹽，并釋放一摩爾H2O2，再通過(guò)過(guò)氧化物酶比色測(cè)定H2O2含量并產(chǎn)生昆亞胺染料。樣品中還有高含量的D-葡萄糖和麥芽糊精可在測(cè)定前用含水乙醇（80% v）。一個(gè)樣品可以在70分鐘完成。24個(gè)樣品可以在2小時(shí)內(nèi)完成。特異性，靈敏度，線性范圍和精確性這個(gè)分析可用于測(cè)定α-葡聚糖（包括淀粉，糖原，植物糖原和非抗性麥芽糊精）。小吸光度差異為0.10吸光度單位。這相當(dāng)于當(dāng)樣品體積為1.00 mL時(shí)，1.0 mg D-葡萄糖（或0.9 mg 淀粉）/樣品溶液L。檢測(cè)限為2.0 mg D-葡萄糖（1.8 mg淀粉）/L，這是在0.020的吸光度單位差異，大樣品體積為1.00 mL得到的。檢測(cè)的線性范圍為5-100 ug D-葡萄糖，同一樣品分別進(jìn)行兩次測(cè)定,其吸光度值會(huì)有0.005-0.010吸光度單位的變化，這相當(dāng)于樣品體積為1.00 mL時(shí)，樣品溶液中D-葡萄糖濃度0.05-1.0 mg/L。如果樣品是經(jīng)過(guò)稀釋的，在計(jì)算結(jié)果時(shí)候需要乘以相應(yīng)的稀釋系數(shù)(F)，如果在樣品制備階段，樣品是被稱(chēng)量的，如10g/L，可能會(huì)產(chǎn)生0.02 到 0.05 g/100 g的差異。干擾：如果在實(shí)驗(yàn)規(guī)定的時(shí)間內(nèi)(大約5分鐘)完成D-葡萄糖轉(zhuǎn)化過(guò)程,通常認(rèn)為沒(méi)有干擾發(fā)生。這個(gè)也可以進(jìn)一步驗(yàn)證，通過(guò)在實(shí)驗(yàn)的完成時(shí)，向比色皿中加入D-葡萄糖(0.1mL中加入50 ug)，吸光光度值有會(huì)明顯增加。通過(guò)加入內(nèi)標(biāo)物可以對(duì)樣品中的干擾物質(zhì)進(jìn)行鑒定。定量回收試驗(yàn):通過(guò)向樣品中添加內(nèi)標(biāo)物,計(jì)算樣品在處理和提取時(shí)的損失。如:在初的提取步驟時(shí)加入D-葡萄糖
